成功饲养免疫缺陷小鼠的6个注意点
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1. PPE(防护服)
           PPE是保护免疫缺陷小鼠的第一道防线。为了安全,你需要穿上它以便减少过敏、咬伤以及感染人畜共患疾病的危险。对于免疫缺陷小鼠我们需要特别关心其健康状态,所以当我们操作它们的时候需要考虑穿什么。在NRCMM,饲养员在进入动物房前必须先洗澡,穿戴手套、专用鞋、口罩、头套、无菌服。每次进入动物房都需要更换新的PPE,同时相应的操作用品需要减少暴露、小心存放以免污染。
       2. 操作
           首先,放轻松,做到慢且稳。小鼠的免疫系统缺陷意味着皮肤损伤会导致其感染及死亡,所以用镊子夹小鼠是一个基本准则。镊子既防止技术人员被小鼠咬,也避免小鼠接触到技术人员身上的微生物。同时操作过程中镊子的消毒比较方便,但是却可以防止病原微生物、激素、气味等的交叉感染。但是切忌频繁操作小鼠。因为虽然定期检查小鼠是很重要的,但是频繁操作小鼠会干扰小鼠的正常作息甚至可能会增加微生物感染。
       3. 饲养间
           饲养间对免疫缺陷小鼠核心群有重要的影响。建议动物房入口设置门禁、清晰的标志和风淋室。这些可以有效控制研究人员和工作者的流动。另外也可以增加换笼次数,这将有助于降低小鼠粪便中肠道菌群引发的感染。
           另外可以考虑使用微型隔离器或者单独加压通风笼盒饲养免疫缺陷小鼠。饲料和水必须通过紫外和酸化等手段来进行灭菌。在NRCMM,饮用水在进入房间前需过滤、盐酸酸化到PH为2.5-3.0。饲料必须通过辐照或高压灭菌。NRCMM的兽医团队会定期查看温度数据记录仪以及使用生物指示剂来检查高压灭菌器的灭菌效果。
       4. 监测
           监测小鼠的健康是至关重要的。需养成每天观察小鼠的习惯,这样可以快速找到潜在的问题以免问题扩大影响到整个种群。对于监测有四大主要因素:样本量、监测频率、监测类型以及结果分析。
监测方案根据微生物流行病学设计,同时确定样本量。监测频率将由感染的可能性、感染潜在的负面影响以及监测成本共同决定。
           哨兵鼠/随机样本被作为反映种群整体病原体状态的运用典型。这些哨兵鼠可能来自不同品系脏垫料笼盒里的小鼠。对于那些已经检测出感染或有潜在微生物感染的小鼠,我们需要对它们进行隔离检疫。
       5. 洁净度
           洁净的房间可以提升小鼠的“幸福感”。但是怎样才算洁净?下面是一些洁净等级。
           清洁--减少表面微生物。用湿抹布擦干净表面,这时大多数生物体已经转移到抹布上。比如鼠笼的清洁、饲养 间的清洁;同时需要质量控制。
           消毒--破坏大多数表面微生物。用Clidox或者乙醇喷洒后等几分钟再擦干表面。
           灭菌--彻底摧毁表面微生物。灭菌通常是加热(超过致病微生物可以存活的温度)。
           清洁是动物房最基本的要求。消毒是常规工作。在NRCMM,桌子、地板和工具等等都需要日常消毒。灭菌对于饲养免疫缺陷小鼠是至关重要的,比如饲料和饮用水。除此之外,垫料和其它仪器或设备也必须经过灭菌才能进入动物房。
       6. 无菌操作
           由于很多因素的限制,动物房的洁净度可能有时无法保持在最高标准,所以,我们要开发并使用无菌技术。无菌技术是通过掌握感染机制和流行病学来最大化降低潜在感染。这需要建立带有明确目的的培训和再培训机制,使每个人养成无菌意识。

快速参考指南

PPE 操作 饲养间 监测 洁净度 无菌操作
无菌清洗 慢/稳 门禁 常规观察 清洁 培训
手套 不要频繁操作 清晰的标志 哨兵 消毒 验证
专用鞋 镊子 风淋 诊断实验 灭菌 再培训
口罩   增加换笼频率 隔离检疫    
头套   独立高压通风笼盒      
无菌服   水/饲料灭菌      
PARP          

 

 

 

 

 

 

 

翻译自JAX