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教授、副教授



TG/KO小鼠定制

国家遗传工程小鼠资源库(NRCMM)暨南京大学模式动物研究所(MARC)是中国最大的遗传工程小鼠资源库。 除了拥有500多种小鼠品系外,我们从2005年开始,对外提供基因工程改造小鼠的定制服务,包括转基因(TG)和敲除/敲入(KO/KI)服务。 其中敲除/敲入服务又包括全身性敲除(Conventional KO)、条件性敲除(Conditional KO)、点突变敲入(Target Mutation KI)以及人源化(Humanised) 小鼠的制作以及更为复杂的多次打靶小鼠的制作。

     NRCMM提供从基因序列到阳性小鼠的全套服务,包括打靶载体的设计和构建、胚胎干细胞(ES cell)的打靶和筛选、显微注射、后代小鼠的可遗传性检测等。 同时,我们也提供这些遗传工程小鼠的初步表型分析,包括分子水平,代谢、心血管、肿瘤等多方面的系统性分析。


TG:

  • 3个月内完成载体的构建,启动子+基因(基因组DNA或cDNA),并在两端加上Insulator。也可以按客户要求加入一些特殊的片段,如tag, loxP-stop-loxP等序列
  • 完成载体构建后6个月内,完成注射后小鼠的PCR鉴定,提供阳性首建鼠(Founder)5-10只。
  • 目前可以提供的注射背景为C57BL/6J或B6CBF1,如果有特殊背景需要,请联系询问。
  • 可以提供大片段基因注射,如BAC等(100-200Kb)。

    KO/KI:

  • 负责敲除基因的文献调研,根据客户需求负责打靶载体的设计,并进行相应的风险评估。
  • 在确定方案后,3个月内完成打靶载体的构建;4个月内完成ES电转和阳性克隆筛选(PCR和Southern筛选)。2个月完成显微囊胚注射;3个月对得到的小鼠进行鉴定,得到阳性嵌合小鼠;3个月对阳性小鼠进行可遗传性检测,得到杂合子小鼠。
  • 最终向客户提供至少4只基因敲除的F1杂合子小鼠。
  • 目前可以提供的ES细胞背景为C57BL/6或129S6。
  • 可以提供各种复杂设计的设计和构建,并可以完成ES细胞的多次打靶并获得相应阳性F1代小鼠。

     

    如有需要,请与以下人员联系

    张明坤 Email: zhangmk@nicemice.cn 高天芸 Email: gaoty@nicemice.cn
    官敏 Email: guanmin@nicemice.cn
    Tel:86-25-58641534; 86-25-58641543;

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